Daar is twee hoofbronne van kontaminasie in skoonkamers: deeltjies en mikroörganismes, wat veroorsaak kan word deur menslike en omgewingsfaktore, of verwante aktiwiteite in die proses. Ten spyte van beste pogings, sal kontaminasie steeds die skoonkamer binnedring. Spesifieke algemene kontaminasiedraers sluit in menslike liggame (selle, hare), omgewingsfaktore soos stof, rook, mis of toerusting (laboratoriumtoerusting, skoonmaaktoerusting), en onbehoorlike afveegtegnieke en skoonmaakmetodes.
Die mees algemene draer van kontaminasie is mense. Selfs met die strengste kleredrag en die strengste bedryfsprosedures, is onbehoorlik opgeleide operateurs die grootste bedreiging vir kontaminasie in skoonkamers. Werknemers wat nie die skoonkamerriglyne volg nie, is 'n hoërisikofaktor. Solank een werknemer 'n fout maak of 'n stap vergeet, sal dit lei tot kontaminasie van die hele skoonkamer. Die maatskappy kan slegs die netheid van die skoonkamer verseker deur voortdurende monitering en voortdurende opdatering van opleiding met 'n nul kontaminasiekoers.
Ander belangrike bronne van kontaminasie is gereedskap en toerusting. As 'n karretjie of masjien net grof afgevee word voordat dit die skoonkamer binnegaan, kan dit mikroörganismes inbring. Dikwels is werkers onbewus daarvan dat toerusting op wiele oor besmette oppervlaktes rol terwyl dit die skoonkamer binnegestoot word. Oppervlaktes (insluitend vloere, mure, toerusting, ens.) word roetinegewys getoets vir lewensvatbare tellings met behulp van spesiaal ontwerpte kontakplate wat groeimedia soos Trypticase Soy Agar (TSA) en Sabouraud Dextrose Agar (SDA) bevat. TSA is 'n groeimedium wat ontwerp is vir bakterieë, en SDA is 'n groeimedium wat ontwerp is vir skimmels en giste. TSA en SDA word tipies by verskillende temperature geïnkubeer, met TSA wat blootgestel word aan temperature in die 30-35˚C-reeks, wat die optimale groeitemperatuur vir die meeste bakterieë is. Die 20-25˚C-reeks is optimaal vir die meeste skimmel- en gisspesies.
Lugvloei was eens 'n algemene oorsaak van kontaminasie, maar vandag se skoonkamer-HVAC-stelsels het lugkontaminasie feitlik uitgeskakel. Die lug in skoonkamers word gereeld beheer en gemonitor (bv. daagliks, weekliks, kwartaalliks) vir deeltjietellings, lewensvatbare tellings, temperatuur en humiditeit. HEPA-filters word gebruik om die deeltjietelling in die lug te beheer en het die vermoë om deeltjies tot 0.2 µm uit te filter. Hierdie filters word gewoonlik voortdurend teen 'n gekalibreerde vloeitempo laat loop om die luggehalte in die kamer te handhaaf. Humiditeit word gewoonlik op 'n lae vlak gehou om die verspreiding van mikroörganismes soos bakterieë en skimmel wat vogtige omgewings verkies, te voorkom.
Trouens, die hoogste vlak en mees algemene bron van kontaminasie in skoonkamers is die operateur.
Die bronne en toegangsroetes van kontaminasie verskil nie beduidend van bedryf tot bedryf nie, maar daar is verskille tussen industrieë in terme van verdraagsame en ondraaglike vlakke van kontaminasie. Vervaardigers van inneembare tablette hoef byvoorbeeld nie dieselfde vlak van netheid te handhaaf as vervaardigers van inspuitbare middels wat direk in die menslike liggaam ingevoer word nie.
Farmaseutiese vervaardigers het 'n laer toleransie vir mikrobiese kontaminasie as hoëtegnologie-elektroniese vervaardigers. Halfgeleiervervaardigers wat mikroskopiese produkte vervaardig, kan geen partikelkontaminasie aanvaar om die funksionaliteit van die produk te verseker nie. Daarom is hierdie maatskappye slegs bekommerd oor die steriliteit van die produk wat in die menslike liggaam ingeplant moet word en die funksionaliteit van die skyfie of selfoon. Hulle is relatief minder bekommerd oor skimmel, swam of ander vorme van mikrobiese kontaminasie in skoonkamers. Aan die ander kant is farmaseutiese maatskappye bekommerd oor alle lewende en dooie bronne van kontaminasie.
Die farmaseutiese bedryf word deur die FDA gereguleer en moet streng die regulasies vir Goeie Vervaardigingspraktyke (GMP) volg, want die gevolge van kontaminasie in die farmaseutiese bedryf is baie skadelik. Nie net moet medisynevervaardigers verseker dat hul produkte vry van bakterieë is nie, maar hulle moet ook dokumentasie en dophou van alles hê. 'n Hoëtegnologie-toerustingmaatskappy kan 'n skootrekenaar of TV verskeep solank dit sy interne oudit slaag. Maar dit is nie so eenvoudig vir die farmaseutiese bedryf nie, en daarom is dit van kardinale belang vir 'n maatskappy om skoonkamer-bedryfsprosedures te hê, te gebruik en te dokumenteer. As gevolg van koste-oorwegings huur baie maatskappye eksterne professionele skoonmaakdienste om skoonmaakdienste uit te voer.
'n Omvattende omgewingstoetsprogram vir skoonkamers moet sigbare en onsigbare lugdeeltjies insluit. Alhoewel daar geen vereiste is dat alle kontaminante in hierdie beheerde omgewings deur mikroörganismes geïdentifiseer moet word nie, moet die omgewingsbeheerprogram 'n toepaslike vlak van bakteriële identifikasie van monster-ekstraksies insluit. Daar is tans baie bakteriële identifikasiemetodes beskikbaar.
Die eerste stap in bakteriese identifikasie, veral wanneer dit kom by skoonkamer-isolasie, is die Gram-kleuringsmetode, aangesien dit interpretatiewe leidrade kan verskaf oor die bron van mikrobiese kontaminasie. As die mikrobiese isolasie en identifikasie Gram-positiewe kokke toon, kan die kontaminasie van mense afkomstig wees. As die mikrobiese isolasie en identifikasie Gram-positiewe stafies toon, kan die kontaminasie van stof- of ontsmettingsmiddelbestande stamme afkomstig wees. As die mikrobiese isolasie en identifikasie Gram-negatiewe stafies toon, kan die bron van kontaminasie van water of enige nat oppervlak afkomstig wees.
Mikrobiese identifikasie in farmaseutiese skoonkamers is baie noodsaaklik omdat dit verband hou met baie aspekte van gehalteversekering, soos bio-assays in vervaardigingsomgewings; bakteriese identifikasietoetsing van eindprodukte; naamlose organismes in steriele produkte en water; gehaltebeheer van fermentasiebergingstegnologie in die biotegnologiebedryf; en mikrobiese toetsverifikasie tydens validering. Die FDA se metode om te bevestig dat bakterieë in 'n spesifieke omgewing kan oorleef, sal al hoe meer algemeen word. Wanneer mikrobiese kontaminasievlakke die gespesifiseerde vlak oorskry of steriliteitstoetsresultate kontaminasie aandui, is dit nodig om die doeltreffendheid van skoonmaak- en ontsmettingsmiddels te verifieer en die identifisering van kontaminasiebronne uit te skakel.
Daar is twee metodes vir die monitering van omgewingsoppervlaktes in skoonkamers:
1. Kontakplate
Hierdie spesiale kultuurbakkies bevat steriele groeimedium, wat voorberei word om hoër as die rand van die bakkie te wees. Die kontakplaatbedekking bedek die oppervlak wat gemonster moet word, en enige mikroörganismes wat op die oppervlak sigbaar is, sal aan die agar-oppervlak kleef en inkubeer. Hierdie tegniek kan die aantal mikroörganismes wat op 'n oppervlak sigbaar is, wys.
2. Deppermetode
Dit is steriel en word in 'n geskikte steriele vloeistof gestoor. Die depper word op die toetsoppervlak aangebring en die mikro-organisme word geïdentifiseer deur die depper in die medium te herwin. Deppers word dikwels op ongelyke oppervlaktes of in areas gebruik wat moeilik is om met 'n kontakplaat te monster. Deppermonsterneming is meer van 'n kwalitatiewe toets.
Plasingstyd: 21 Okt-2024