1. Doel: Hierdie prosedure het ten doel om 'n gestandaardiseerde prosedure vir aseptiese operasies en die beskerming van steriele kamers te verskaf.
2. Toepassingsgebied: biologiese toetslaboratorium
3. Verantwoordelike Persoon: QC Superviseur Toetser
4. Definisie: Geen
5. Veiligheidsmaatreëls
Voer streng aseptiese operasies uit om mikrobiese kontaminasie te voorkom; operateurs moet die UV-lamp afskakel voordat hulle die steriele kamer binnegaan.
6. Prosedures
6.1. Steriele kamers moet toegerus wees met 'n steriele operasiekamer en 'n bufferkamer. Die netheid van die steriele operasiekamer moet klas 10000 bereik. Die binnenshuise temperatuur moet tussen 20-24°C en die humiditeit tussen 45-60% gehandhaaf word. Die netheid van die skoon werkbank moet klas 100 bereik.
6.2. Steriele kamers moet skoon gehou word, en dit is streng verbode om puin op te hoop om kontaminasie te voorkom.
6.3. Voorkom streng die kontaminasie van alle sterilisasietoerusting en kultuurmedia. Diegene wat besmet is, moet ophou om dit te gebruik.
6.4. Steriele kamers moet toegerus wees met ontsmettingsmiddels met 'n werkende konsentrasie, soos 'n 5% kresoloplossing, 70% alkohol, 0.1% chlormetionienoplossing, ens.
6.5. Steriele kamers moet gereeld gesteriliseer en skoongemaak word met 'n geskikte ontsmettingsmiddel om te verseker dat die netheid van die steriele kamer aan die vereistes voldoen.
6.6. Alle instrumente, gereedskap, skottelgoed en ander items wat na 'n steriele kamer gebring moet word, moet styf toegedraai en met gepaste metodes gesteriliseer word.
6.7. Voordat personeel die steriele kamer binnegaan, moet hulle hul hande met seep of ontsmettingsmiddel was, en dan spesiale werksklere, skoene, hoede, maskers en handskoene in die bufferkamer aantrek (of hul hande weer met 70% etanol afvee) voordat hulle die steriele kamer binnegaan. Voer die bewerkings in die bakteriese kamer uit.
6.8. Voordat die steriele kamer gebruik word, moet die ultravioletlamp in die steriele kamer vir meer as 30 minute aangeskakel wees vir bestraling en sterilisasie, en die skoon werkbank moet terselfdertyd aangeskakel wees vir lugblaas. Nadat die operasie voltooi is, moet die steriele kamer betyds skoongemaak word en dan vir 20 minute met ultravioletlig gesteriliseer word.
6.9. Voor inspeksie moet die buitenste verpakking van die toetsmonster ongeskonde gehou word en nie oopgemaak word om kontaminasie te voorkom nie. Gebruik 70% alkohol-watteballetjies om die buitenste oppervlak voor inspeksie te ontsmet.
6.10. Tydens elke operasie moet 'n negatiewe kontrole gedoen word om die betroubaarheid van die aseptiese operasie na te gaan.
6.11. Wanneer jy bakteriese vloeistof absorbeer, moet jy 'n suigbal gebruik om dit te absorbeer. Moenie die strooitjie direk met jou mond aanraak nie.
6.12. Die inentingsnaald moet voor en na elke gebruik met 'n vlam gesteriliseer word. Na afkoeling kan die kultuur ingeënt word.
6.13. Die strooitjies, proefbuise, petribakkies en ander gereedskap wat bakteriese vloeistof bevat, moet in 'n sterilisasie-emmer met 'n 5% Lysol-oplossing vir ontsmetting geweek word, en na 24 uur uitgehaal en afgespoel word.
6.14. Indien daar bakteriese vloeistof op die tafel of vloer gemors word, moet u onmiddellik 'n 5% karbolsuuroplossing of 3% Lysol vir ten minste 30 minute op die besmette area gooi voordat u dit behandel. Wanneer werksklere en hoede met bakteriese vloeistof besmet is, moet dit onmiddellik uitgetrek en gewas word na hoëdruk-stoomsterilisasie.
6.15. Alle items wat lewende bakterieë bevat, moet ontsmet word voordat dit onder die kraan afgespoel word. Dit is streng verbode om die riool te besoedel.
6.16. Die aantal kolonies in die steriele kamer moet maandeliks nagegaan word. Met die skoon werkbank oop, neem 'n aantal steriele petri-bakkies met 'n binnediameter van 90 mm, en spuit asepties ongeveer 15 ml voedingsagar-kweekmedium in wat gesmelt en afgekoel is tot ongeveer 45°C. Na stolling, plaas dit onderstebo by 30 tot 35 ℃. Inkubeer vir 48 uur in 'n ℃-inkubeerder. Nadat steriliteit bewys is, neem 3 tot 5 plate en plaas dit links, middel en regs van die werkposisie. Nadat die deksel oopgemaak en vir 30 minute blootgestel is, plaas dit onderstebo in 'n 30 tot 35°C-inkubeerder vir 48 uur en haal dit uit. ondersoek. Die gemiddelde aantal diverse bakterieë op die plaat in 'n klas 100 skoon area mag nie 1 kolonie oorskry nie, en die gemiddelde aantal in 'n klas 10000 skoon kamer mag nie 3 kolonies oorskry nie. Indien die limiet oorskry word, moet die steriele kamer deeglik ontsmet word totdat herhaalde inspeksies aan die vereistes voldoen.
7. Verwys na die hoofstuk (Steriliteitsinspeksiemetode) in "Medisynehigiëniese inspeksiemetodes" en "China Standard Operating Practices for Drug Inspection".
8. Verspreidingsafdeling: Gehaltebestuursafdeling
Tegniese leiding vir skoonkamers:
Nadat ons 'n steriele omgewing en steriele materiale verkry het, moet ons 'n steriele toestand handhaaf om 'n spesifieke bekende mikroörganisme te bestudeer of hul funksies te benut. Andersins kan verskeie mikroörganismes van buite maklik inmeng. Die verskynsel van die vermenging van irrelevante mikroörganismes van buite word in mikrobiologie kontaminerende bakterieë genoem. Die voorkoming van kontaminasie is 'n kritieke tegniek in mikrobiologiese werk. Volledige sterilisasie aan die een kant en voorkoming van kontaminasie aan die ander kant is twee aspekte van aseptiese tegniek. Daarbenewens moet ons verhoed dat die mikroörganismes wat bestudeer word, veral patogene mikroörganismes of geneties gemanipuleerde mikroörganismes wat nie in die natuur bestaan nie, uit ons eksperimentele houers in die eksterne omgewing ontsnap. Vir hierdie doeleindes is daar in mikrobiologie baie maatreëls.
'n Steriele kamer is gewoonlik 'n klein kamer wat spesiaal in 'n mikrobiologie-laboratorium ingerig is. Dit kan met plate en glas gebou word. Die area moet nie te groot wees nie, ongeveer 4-5 vierkante meter, en die hoogte moet ongeveer 2.5 meter wees. 'n Bufferkamer moet buite die steriele kamer opgestel word. Die deur van die bufferkamer en die deur van die steriele kamer moet nie in dieselfde rigting wys nie om te verhoed dat lugvloei diverse bakterieë inbring. Beide die steriele kamer en die bufferkamer moet lugdig wees. Binnenshuise ventilasietoerusting moet lugfiltrasietoestelle hê. Die vloer en mure van die steriele kamer moet glad wees, moeilik om vuilgoed te bevat en maklik om skoon te maak. Die werkoppervlak moet gelyk wees. Beide die steriele kamer en die bufferkamer is toegerus met ultravioletligte. Die ultravioletligte in die steriele kamer is 1 meter van die werkoppervlak af. Personeel wat die steriele kamer binnegaan, moet gesteriliseerde klere en hoede dra.
Tans bestaan steriele kamers meestal in mikrobiologie-fabrieke, terwyl algemene laboratoriums skoon werkbanke gebruik. Die hoofdoel van die skoon werkbank is om 'n laminêre lugvloei-toestel te gebruik om verskeie klein stofdeeltjies, insluitend mikroörganismes, op die werkoppervlak te verwyder. Die elektriese toestel laat lug deur die HEPA-filter beweeg en dan die werkoppervlak binnedring, sodat die werkoppervlak altyd onder beheer van vloeiende steriele lug gehou word. Boonop is daar 'n hoëspoed-luggordyn aan die kant naby die buitekant om te verhoed dat eksterne bakteriese lug binnedring.
In plekke met moeilike toestande kan houtsteriele bokse ook in plaas van 'n skoon werkbank gebruik word. Die steriele boks het 'n eenvoudige struktuur en is maklik om te skuif. Daar is twee gate aan die voorkant van die boks, wat deur druk-trek-deure geblokkeer word wanneer dit nie in werking is nie. Jy kan jou arms tydens werking insteek. Die boonste gedeelte van die voorkant is met glas toegerus om interne werking te vergemaklik. Daar is 'n ultravioletlamp binne-in die boks, en eetgerei en bakterieë kan deur 'n klein deurtjie aan die kant ingesit word.
Aseptiese operasietegnieke speel tans nie net 'n sentrale rol in mikrobiologiese navorsing en toepassings nie, maar word ook wyd gebruik in baie biotegnologieë. Byvoorbeeld, transgeniese tegnologie, monoklonale teenliggaamtegnologie, ens.
Plasingstyd: 6 Maart 2024